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1. Positive control spots이 나오지 않으면 어떻게
해야 하나요?
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Problem
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Corrective action
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Detection ab나 SA-HRP농도 너무 낮다
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알맞은 농도/dilution 사용
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Chemiluminsecent reagents 잘못됨
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프로토콜에 따라 fresh한
reagents로 다시 반복
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Film에 불충분하게
노출
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노출 시간을 늘림
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2. Target spots이 signal이 낮아요.
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Problem
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Corrective action
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너무 높은 sample
dilution
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더 많은 샘플 사용
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샘플 안 analyte abundance가 낮다
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더 많은 샘플 사용
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다른 cell line 사용
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Cell의 적합한 상태를 확인
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준비동안
샘플이 나빠진 경우
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Protease, phosphatase inhibitors와
supplement buffer의 보관 확인
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저장동안
샘플이 나빠진 경우
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모든 샘플 저장 -70도
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얼리고 녹이는 과정 피함
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Film에 노출
시간이 불충분
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노출시간 늘림
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3. Negative
control spots이 많이 나와요.
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Problem
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Corrective action
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Detection ab나 SA-HRP농도 너무 높다
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알맞은 농도/dilution 사용
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샘플 농도 높다
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적은 샘플 사용
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4. Array의 blank 부위에 background 높아요.
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Problem
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Corrective action
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불충분한 washing
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프로토콜에 나와있는
volume으로 washing
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4-well multi-dish가 아닌 큰 container에서 washing
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Detection ab나 SA-HRP농도 너무 높다
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알맞은 농도/dilution 사용
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부분적으로 array가
dry out
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항상 array가 잠기도록 유지,
공기에 노출 줄임
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구겨지거나 찢어진
array
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끝이 평평한 포셉
사용
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5. 너무 많은 signals이 나올 땐 어떻게 해야 하나요?
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Problem
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Corrective action
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불충분한 washing
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4-well
multi-dish가 아닌 큰 container에서
washing
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Detection ab나 SA-HRP농도 너무 높다
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알맞은 농도/dilution 사용
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샘플 농도 높다
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적은 샘플 사용
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